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克隆嵌板法

关键词: 克隆 嵌板法来源: 互联网

克隆嵌板法(clone panel method)是应用杂种细胞保留或丢失人染色体有时有重叠现象而设计的一种简便有用的基因定位方法。如果某一表型特征只出现于克隆A、C而不见于B,就可决定该特征的基因只能在3号染色体上,因为A、C克隆都有3号染色体,而B克隆则无,其它亦可同理判断这样3个克隆可对8条(23=8)染色体作出判断;如果是5个克隆(25=32)就可对人类22条常染色体和2条性染色体作出判断。例如半乳糖激酶(GK)、尿苷-磷酸激酶(UMPK)和氨基已糖苷酶A(HEXA)的基因就是用此法分别定位于人的17号、1号和15号染色体上的。此外,还可对杂种细胞进行特殊染色,来识别杂种细胞中人和鼠染色体,以助基因定位。在体细胞杂交基础上还发展了微细胞(micro cell)技术,即制备只含少数或一条人染色体的微细胞进行细胞杂交。也可将人中期染色体进行分离直接转移到鼠类细胞中,使人染色体在受体细胞中裂解变成短的DNA片段,并整合到受体细胞的基因组中。如两个基因同时整合进去,就证明它们的紧密连锁关系。

 

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