人脑源性神经因子(BDNF)化学发光免疫检测试剂盒原理及...
基本原理:
本试剂盒采用双抗体夹心法。用抗Human BDNF抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的BDNF会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Human BDNF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗Human BDNF抗体与结合在包被抗体上的Human BDNF结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入发光底物混合液,发光底物在辣根过氧化物酶的催化下发出荧光,用化学发光免疫分析仪测定化学发光值(CL),BDNF浓度与化学发光值之间呈正相关,通过绘制标准曲线求出标本中BDNF的浓度。
操作步骤:
1.在各孔中加入标准品或样品各 100μL,37℃孵育90分钟
2. 倒去孔内液体,拍干,加入 100μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育 60 分钟
3. 洗涤 3 次
4. 加入 100μL 酶结合物工作液, 37℃孵育 30 分钟
5. 洗涤 5 次
6. 加入 100μL 底物溶液, 37℃孵育 5 分钟左右
7. 读数
8. 结果计算
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