氨甲喋呤抗性和 DHFR 扩增
实验方法原理 | 将细胞依次置于浓度逐渐增加的叶酸拮抗剂中,如氨甲蝶呤(MTX ) 中,经过一段时间,细胞会产生对药物毒性的抵抗 [ Biedler et al ,1972 ],这是 DHFR 基因扩增的结果,这种抗性通常产生得非常快,当然可能还有其他机制部分或全部参与到抗性表型的形成中,比如,抗叶酸转运方面的改变和(或)突变影响酶结构或亲和力。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 克隆培养亲代细胞形成生长旺盛、基因型一致的细胞群体,用于筛选。 |
实验方法原理 | 将细胞依次置于浓度逐渐增加的叶酸拮抗剂中,如氨甲蝶呤(MTX ) 中,经过一段时间,细胞会产生对药物毒性的抵抗 [ Biedler et al ,1972 ],这是 DHFR 基因扩增的结果,这种抗性通常产生得非常快,当然可能还有其他机制部分或全部参与到抗性表型的形成中,比如,抗叶酸转运方面的改变和(或)突变影响酶结构或亲和力。 |
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实验材料 | |
试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | |
实验步骤 | 1. 克隆培养亲代细胞形成生长旺盛、基因型一致的细胞群体,用于筛选。 |