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乙肝病毒血清标志物测定的质量保证

2019.7.10

1 基本慨念

1.1 室内质量控制（internal quality control,IQC）

质量管理的一部分，致力于满足质量要求。其基本特征具有：由实验室自身人员执行；监测和评价精密度；对测定结果的实时性评价。

1.2 室间质量评价(external quality assessment,EQA)

多个标本周期性地发送到实验室进行分析和/或鉴定，将每一实验室的结果与同组的其他实验室的结果或指定值进行比较，并将比较的结果报告给参与的实验室。其基本特征具有：执行者为外单位第三方机构；监测和评价准确度；对测定结果的回顾性评价。

1.3 质量保证(quality assurance,QA)

质量管理的一部分，致力于提供质量要求会得到满足的信任。

1.4室内质量控制、室间质量评价和质量保证之间的关系

临床实验室常规测定的步骤很多，基本上可分为样本收集、实验室测定过程和结果报告及其解释等。IQC仅覆盖上述各步中的测定分析步骤。EQA除了监测测定分析步骤外，还包括一个较大范围的实验实活动，如在样本接收中样本处理的可靠性，以及测定结果的报告和解释。QA覆盖了更宽范围的活动，最为重要的是样本收集、结果报告和解释阶段。

2 室内质量控制（IQC）

2.1 测定前的质量控制

2.1.1 实验室的环境、设施和设备充分的空间、良好的照明和空调设备是保证做好实验的前提。实验仪器的定期校准和维护是保证检测结果准确可靠的基础（微量加样器、温育箱、洗板机及酶标仪）。

2.1.2 理想的测定试剂和方法

2.1.3 合格的人员 “ 三基”和“三严”训练和要求。

制定和实施标准操作程序（standard operatin procedure,SOP）。

2.2 统计学质量控制

统计学质量控制就是使用室内质控物与临床常规标本同时检测，然后根据室内质控物的测定结果，采用统计学的原理方法判断所进行的临床常规标本测定是否在控的一种质量控制措施。

2.2.1 质控品的选择质控品可购买商业质控品或自制。要求无基质效应、稳定、无已知传染危险性、靶值或预期结果已定、单批可大量获得、价廉、所含待测物浓度接近试验或临床决定性水平。卫生部临检中心所提供0.5ng-1ng/mlHBsAg质控品适宜选用作为HBsAg测定用质控品。

2.2.2 质控方法

2.2.2.1 基线测定 Whitehead提出先做OCV(optimal conditions variance,OCV)和RCV(routine conditions variance,RCV)测定，掌握批间变异及批内变异和质控物测定准确度评价。也可直接测定RCV进入计算。既可用S/CO值进行计算，也可用原始OD值计算。

2.2.2.2 质控规则的表达方式及意义质控规则通常用 AL表示，A表示质控测定中超出质量控制线的测定值的个数，L为控制线，通常用均值或均值±1－3SD表示。

多规则质控规则（Westgard）及意义

12S 一个质控测定值超出X±2S控制线，预警。

13S 一个质控测定值超出X±3S控制线，失控。

22S 二个连续的质控测定值同时超出X+2S或X-2S控制线，失控。

R4S 同一批测定中，2个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出4S控制线，失控。

41S 4个连续的质控测定值同时超出X+1S或X-1S控制线，失控。

10X 10个连续的质控测定值同时处于均值（X）的同一侧，失控。

2.2.2.3 Levey-Jennings质控图方法

实验实最常用的质控图，也称Shewhart质控图，由Shewhart于1924年首先提出，并用于工业品的质量控制。20世纪50年代Levey-Jinnings将其引入临床检验的质量控制。各个实验室可根据各自情况选用不同质控规则综合判定。在质控图上记录结果时，应同时记录测定的详细情况，如日期、试剂、质控物批号和含量及测定者姓名等。

2.2.2.4 Z计分质控图方法（Z-score charts）

Z计分质控图适用使用多个质控物进行质控的情况下，可在同一质控图上同时记录不同质控物测定结果。Z计分＝（Xn-X）/S，其中Xn为特定质控物的第n个测定值，X为该质控物的测定均值，S为标准差。因此，“Z计分”实质是计算质控物测定值偏离均值相当于多少个标准差。

2.2.2.5 “即刻法”质控方法

“即刻法”质控方法的实质是一种统计学方法，即Grubs异常质取舍法，只要有3个以上的数据即可决定是否有异常值的存在。适合检测批次较少的项目开展质控。具体步骤如下：

⑴ 将连续的质控测定值按从小到大排列，即X1,X2,X3,X4……Xn(X1为最小值，Xn为最大值)；

⑵ 计算均值（X）和标准差(S)；

⑶ 按下述公式计算SI上限和SI下限值；

SI上限＝X最大值-X SI下限=X-X最小值

S S

⑷ 将SI上限和SI下限值与SI值表中的数值比较。

即刻法质控SI值表

n n3S n2S n n3S n2S

3 1.15 1.15 12 2.55 2.29

4 1.49 1.46 13 2.61 2.33

5 1.75 1.67 14 2.66 2.37

6 1.94 1.82 15 2.71 2.41

7 2.10 1.94 16 2.75 2.44

8 2.22 2.03 17 2.79 2.47

9 2.32 2.11 18 2.82 2.50

10 2.41 2.18 19 2.85 2.53

11 2.48 2.23 20 2.88 2.56

质控结果的判断：SI上限和SI下限值均小于表中n2S对应的值时，说明质控测定值的变化2S在内，是可以接受的。如SI上限和SI下限值中之一处于n2S和n3S对应的值之间时，说明该质控值的变化2S-3S之间，处于“告警”状态。当SI上限和SI下限值之一大于n3S对应的值时，说明该质控值的变化已超出3S，属“失控”。

2.2.2.6 临床免疫室室内质量控制要求

⑴ 室内质控

质控品：定性测定的室内质控品，除了试剂盒所带的阴阳性对照外，实验室还应选择至少2个实内质控品，其中一个为弱阳性质控品，接近CO值，S/CO值应该为2－4之间，另一个为阴性质控品。

测定频度：每台仪器，每次检测患者样本时至少测定一次室内质控品。ELISA测定每块板都要测定室内质控品。

质控图绘制：定性测定可采用弱阳性质控品的S/CO值作质控图。定性测定为弱阳性的质控品不能测定为阴性，阴性质控品不能测定为阳性。

胶体金、胶体硒等试纸条快速检测可不做室内质控品的测定。凝集试验，血凝及胶乳凝集试剂的室内质控品可采用试剂盒所带的阴阳性对照。

⑵ 相同检验项目在不同的仪器和系统上进行检测时,要对检测结果的可比性进行比对。

样本：每个项目应选择至少5份新鲜病人血清。

结果判断：100%合格。

比对频度：每年至少一次。

比对项目：在不同仪器或系统上测定的同一项目。

⑶ 系统的完整性和有效性酶标仪、全自动酶免分析系统、全自动加样系统、PCR仪、加样器、温箱（包扩水浴箱）、温度计等对测定结果有影响的仪器和设备都要制定维护、比对/校准程序。维护、比对/校准的频度应参照厂家要求进行，对于无法校准的仪器和设备，可用年维护记录来代替，但是必需有相应的实验数据。