眼科标本培养常见问题答疑
问:眼科标本中分出的细菌虽然第一位是表葡,但是这里真正致病菌的比例大概有多少?眼部标本表葡实验室需要做药敏还是提示即可?
答:除了个别医院或实验室百分之七八十都是表葡值得怀疑外,大部分不能算污染,眼科医生或实验室人员认为眼部细菌感染菌谱构成比中一半左右算是可以接受,我院在近年统计中显示约占百分之三四十,其中眼表标本占比略高于眼内标本。因此表皮葡萄球菌的药敏也都是做的,并报告给临床。
问:眼科常见的标本类型有哪些?哪些属于有菌部位,哪些属于正常菌群?哪些属于无菌标本?
答:眼部标本种类多,至少包括结膜囊分泌物、结膜刮片、角膜刮片、泪道分泌物、泪道结石、(前)房水、玻璃体等(可参考解剖图示),每一种标本采集的方法不一样,注意事项及处理方法也有不同。眼睑、皮肤表面,睑缘,睫毛、结膜等眼表部位都可能培养出细菌。
眼表正常菌群包括:葡萄球菌、链球菌、不动杆菌、棒状杆菌、嗜血杆菌、奈瑟菌、莫拉菌等;大约90%的人结膜囊内可分离出一种或以上的细菌,>60%是表皮葡萄球菌,35%为类白喉杆菌,厌氧的痤疮丙酸杆菌也可分离到。眼内属无菌部位,比如房水、玻璃体、眼内手术切取的组织均为无菌标本,无菌部位只要采样及前处理规范,培养阳性即可认为是致病菌。
问:常见的原始标本涂片意义如何?既然那么多细菌可能是条件致病菌,有什么好的方法去区分致病菌和污染菌?分离出嗜血杆菌或不动杆菌我们何时判断为正常菌?如何报告临床?
答:在我们的工作中,角膜刮片、结膜囊分泌物的镜检阳性率均可以达到40%以上,而培养阳性率略高于50%,且涂片和培养结果的一致性不错(完全符合占70%以上),可见原始标本直接镜检的重要性。这里有一个需要提醒的现象是,当有外伤或角膜穿孔时,有时候会有色素颗粒脱落,其镜下与细菌形态容易混淆,需注意区分。
对于区分致病菌还是污染菌,我们认为眼部标本有其特殊性,如果采集规范,则根据视野下背景情况及临床表现基本可以判断。这里有一点体会可以提供给各位,视野中白细胞比较多,且以中性粒细胞为主,常常提示细菌感染,淋巴细胞增多则提示病毒感染,上皮细胞为主或上皮细胞伴白细胞增多时,提示真菌感染。
我们没有要求必须找到细菌被吞噬才认为是感染,因为眼部标本确实不好采集,有时候采集到的标本量非常有限,能找到就已经不错了。但如果发现一些非常见的致病菌,且直接镜检时,背景很杂,又有多种细菌找到,尤其是培养后发现多种细菌生长,量又不多时,会考虑污染(有外伤史等特殊情况者则需要考虑更多可能性)。