实验动物染毒途径和技术-2
实验动物 |
呼吸量 |
最低呼吸量 |
静式染毒2h可放动物数 |
||||
25L |
50L |
100L |
300L |
1000L |
|||
小鼠 |
1.45 |
4.50 |
3-5 |
6-10 |
12-15 |
36-40 |
120-150 |
大鼠 |
10.18 |
30.54 |
0 |
1 |
1-2 |
5-6 |
16-18 |
豚鼠 |
10.18 |
30.54 |
0 |
1 |
1-2 |
3-4 |
16-18 |
猫 |
19.30 |
57.90 |
0 |
0 |
0 |
3-4 |
9-10 |
家兔 |
41.5 |
126.80 |
0 |
0 |
0 |
1 |
4-5 |
猴 |
51.60 |
154.80 |
0 |
0 |
0 |
1 |
3-4 |
狗 |
321.60 |
97.80 |
0 |
0 |
0 |
0 |
1 |
实验步骤:
(1)将动物放人染毒柜(亦可连动物笼一起放人染毒柜)。
(2)将染毒柜密闭好。
(3)从投药孔将所需受试物加到药物蒸发器上,随即塞好投药孔井开始计算染毒时
(4)观察实验动物的症状、死亡时间,并仔细记录。
(5)染毒结束后,关闭电源,打开门(盖),驱出柜内残存有毒空气,取出动物,存活者归笼继续观察。
(6)冲洗染毒柜,将动物排泄物冲干净,擦干染毒柜备用。
2.动式吸入染毒 动式吸入染毒设备由染毒柜、机械通风系统和配气系统三部分构成对设备的要求较高,优点是在染毒过程中染毒柜内氧分压及受试物浓度较稳定,缺点是消耗受试物的量大,并易于污染环境。动式吸入染毒又分为整体接触和口鼻接触两种,此设备设计为维持每小时12~15次的换气,保证氧气浓度为19%受试物的均匀分布。染毒柜应维持成轻微的负压以免受试物从染毒柜逸出。要保证染毒柜中气流的稳定性,实验动物的总体积不能超过染毒柜容积的5%。如采用鼻—口或头部暴露吸入染毒法,可避免经口和皮肤同时接触受试物。应使用适当的浓度控制系统。应调整空气流速,以保证整个设备的条件一致。
在染毒柜中受试物浓度达平衡后,每天的染毒时间应为6h。在必要时,也可利用其他的暴露时间。从实际考虑,每周染毒;天是可接受的。
进行试验时温度应维持在(22±2)℃。相对湿度最好保持40%一60%之间(但不适用于气溶胶试验).染毒过程中,停止供食和供水。
在进行下述的测量或监测时,应尽可能地使维持恒定:①气流速度,每次暴露应监测≥3次。②受试物的实际浓度和气溶胶浓度粒度分析,每次暴露测2—4次。③连续监测温度,每30min记录一次。
3.气管内注入;此法用于建立急性中毒模型及尘肺研究。以大鼠为例,用乙醚轻度
麻醉大鼠(侧卧即可),将麻醉的大鼠用线套住其门齿,挂在染尘架上,鼠背向操作者。用无齿镊夹住并拉出舌头,用小块纱布包裹舌头,用左手拉住。右手取耳镜放人大鼠口腔,暴露气管开口。使光线照射于耳镜,可见随呼吸时张时闭的v形白环(声带)。术者左手松开大鼠舌头并固定耳镜,右手接过助手传递的钝头穿刺针,待v形口张开时把针头插入气管约1-1.5cm,此时针头已达气管的上中段。助手将吸好注射液的注射器接在穿刺针上,回抽如有气泡,证明位于气管内,即可将受试液注入气管内。术前所有用具和受试液均应消毒,必要时可在受试液中加青霉素2000IU/ml。