高效液相色谱仪内部标准法分析法概述
由于吸附或化学反应等原因,高效液相色谱仪色谱柱不能让所有组分流出,或者所有组分都可以流出,但是检测器不能给所有组分提供相应的色谱峰,或者有些样品太大(不能获得完整的峰),或者太小,或者只需要对复杂样品中的几个组分进行定量分析,可以采用内标法。
过程:如果在总质量为m的样品中加入质量为mS的内标物质s,则根据被测物质和内标物质的重量以及高效液相色谱仪的色谱图上相应的峰面积比,得到某一组分ⅰ的含量
mi/ms = fiAi / fsAs
Ci = mi/m ×100%
= fiAi ms / fsAs m×100%
*优点:所有部件不需要达到峰值(校正系数),操作条件和注射量基本不受影响。
*缺点:很难找到内部标准-稳定且无反应、结构性能、相似性、保留时间插值和完全分离
*注:内标法更适合低含量成分的分析。通常,被选为内标的物质优选不存在于样品中,其保留值在所有组分的保留值中间。添加的内部标准的内容和待测试组件的内容不应有很大差异。
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