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蔓荆子黄素的含量测定

2018.3.27

  2、仪器与试剂

  2、1仪器 美国热电TSP高效液相色谱仪,7725i自动进样器,AG135十万分子一电子天平

  2、2 试剂 甲醇、磷酸均为分析纯,水为双重蒸馏水,对照品蔓荆子黄素自制,经HPLC分析,纯度为99.58%,蔓荆子提取物自己生产。

  3、含量测定

  3、1 色谱条件:色谱柱C18柱,流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(60:40),检测波长258NM,流速1.0ml/min,柱温:30℃

  3、2 标准曲线的制备:精密称取干燥至恒重的蔓荆子黄素对照品1.5mg,置于10ml容量瓶中,甲醇溶解定容,作为对照品溶液。精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置10ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,照上述条件测定,以蔓荆子黄素的峰面积积分值为纵坐标,其浓度为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程:C=2.225×10-7A-4.72×10-4,r=0.9999,其线性范围在0.015mg/ml—0.075mg/ml。

  3、3 样品的测定:精密称取蔓荆子提取物25mg,置于50ml容量瓶中,加甲醇溶解,超声振荡,定容过滤,取续滤液,即为供试品溶液。照上述方法测定,计算含量即得。

  3、4 回收率实验:精密称取已知含量的蔓荆子提取物25mg,加入蔓荆子黄素对照品0.75mg,按照样品测定项下进行处理,测定,计算回收率:98.18%,RSD=1.46%。

  3、5 精密度试验:在上述条件下,对同一浓度的对照品溶液连续6次进样,计算峰面积平均值,RSD为0.945%。

  3、6 重现性试验 按照样品测定方法,对同一批号样品进行5次平行试验,蔓荆子黄素含量RSD为1.72%。

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