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PH范围色谱柱基本要求和选择活动要点

2018.12.27

PH范围色谱柱基本要求

①与固定相不互溶,不发生化学反应。

②对样品有适宜的溶解度,要求k值在可用范围。溶解度太大,k值太小,不利于分离;溶解度太小,k值太大,可能使样品在活动相中产生沉淀。

③必须与检测器相适应。例如用紫外检测器,活动相本身在检测波优点应无吸收。

④活动相的粘度要小,可以降低色谱柱的阻力而进步柱效。

⑤纯度高,不含机械杂质。

 

PH范围色谱柱选择活动时需要考虑

①活动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时碰到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性活动相不能用于硅胶柱系统。酸性活动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。

②纯度。色谱柱的寿命与大量活动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。

③必须与检测器匹配。使用UV检测器时,所用活动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作活动相,以进步灵敏度。

④粘度要低

⑤对样品的溶解度要适宜。假如溶解度欠佳,样品会在柱头沉淀,不但影响了纯化分离,且会使柱子恶化。

⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。



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