AWWA PATH56526
紫外光对小隐孢子虫卵囊的诊断程序和灭活：项目总结结果

Diagnostic Procedure and Inactivation of Cryptosporidium parvum Oocysts by UV-Light: A Project Summary Results

标准号

AWWA PATH56526

发布

1970年

发布单位

SCC

当前最新

AWWA PATH56526

 

 

适用范围

该项目是一项研究，旨在比较用于检测宿主体内隐孢子虫感染的诊断程序（粪便检查和活检）。检查了隐孢子虫卵囊的传染性。使用蔗糖梯度纯化从受感染牛的粪便样本中获得的卵囊。研究中的卵囊在用于紫外线消毒和传染性实验时已有四到六周大。将卵囊悬浮在去离子水中，并暴露于明确剂量的紫外线 (UV) 光 (254 mm)。实验是在实验室条件下在专门建造的仪器中进行的。在培养皿中，总体积为 30 毫升，卵囊浓度为 1 x 106/毫升，并应用了四种选定的紫外线剂量（300、150、75、30 J/m2）。使用 SCID 小鼠模型进行体内感染性测定后测量卵囊存活率，并与未暴露对照的感染率进行比较。SCID 小鼠（CB-17-SCID/IcrCrl，雄性和雌性，4 周龄）由德国 Charles River GmbH 提供。使用几个组，每组通常有五只动物。每组小鼠口服 0.5 毫升适当接种物，接种物介于 2.5 至 10 x 105（250,000、450,000 和 500,000、1,000,000）个暴露样本的卵囊之间，如前所述。每只接种的动物被关在单独的笼子里。已应用两种诊断技术来检测隐孢子虫卵囊：在接种后 5 至 18 天（dpi）收集接种小鼠的粪便样本，用蒸馏水稀释，使用不连续蔗糖梯度分离卵囊，然后通过直接免疫荧光（DIF）检测，（Crypto-CELL，Cellabs Pty.）；接种后 15-18 天通过颈椎脱位处死小鼠。还描述了与未感染动物和粪便检查结果相比的小肠肠道表现和组织病理学。已准备了每个实验中每只小鼠的小肠（十二指肠、空肠和回肠）碎片以进行组织病理学分析。将组织固定在甲醛中，嵌入石蜡中，并用 HE 方法染色薄切片（3-5 微米）。苏木精用于核染色（10-12 分钟），偶氮青霉素用于细胞质染色（7 分钟）。切片染色成紫红色。隐孢子虫卵囊染色成紫蓝色。切片通过 100 倍和 400 倍放大倍数观察。包括 10 个参考文献、表格。

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