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将UNIQ-10柱放入一个新的1.5 mL的离心管中,在柱子膜中央加入70oC预热的水,室温或37oC放置2min; g. 12000rpm,室温离心1 min,离心管中的液体即为回收的DNA片段,可立即使用或存于-20oC备用。 ...
虽然这种方法不适用于脂质组学应用,但已检测到许多半亲脂性代谢物。硬脂酰肉碱是库中最非极性的代谢中间体之一,保留时间为12.8分钟。因此,为了洗脱其他半亲脂性代谢物,RP再生延长至15.1分钟。对血浆中m / z特征的鉴定搜索在第13分钟到第16分钟之间洗脱,主要是对脂质的初步注释。例如,列出了六种脂质作为特征的潜在注释,其在14.47分钟洗脱,m / z为844.5093。...
以最终5X106/ml的细胞密度接种100 ml YPD培养基; 3) 置30℃,200 rpm/min振荡培养至2 X 107/ml,通常需要3-5小时; 4) 用50 ml无菌离心管以3000 X g离心5 min,收获细胞; 5) 弃培养液,悬浮细胞于25 ml无菌水中,同上离心; 6) 弃水,把细胞悬浮在1 ml的100 mmol/L的醋酸锂中,转悬浮物到一个无菌1.5 ml...
(2)缓慢将 9 倍体积的 50 mmol/L 磷酸盐、50 mmol/L NaCl 和 1 mmol/L EDTA(含 2 mmol/L 还原型谷胱甘肽/0.2 mmol/L 氧化型谷胱甘肽)加人溶解的沉淀中。25°C 孵育混合物 2?4 h。10.用适合于目的蛋白的浓缩步骤来回收重折叠的蛋白(如 RP-HPLC、冻干或超过滤)。展开...
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